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技术服务

人体细胞iPSC重编程建系

中盛溯源根据客户科研需求,提供定制化的体细胞重编程等相关服务(例如遗传疾病患者hiPSC的定制)。
我们采用非整合重编程技术,从各种人类成体细胞制备科研级hiPSC细胞株。科研级hiPSC细胞株具有与人类胚胎干细胞(hESC)高度类似的克隆形态和基因表达,长期维持正常核型(不包括一些特殊疾病来源的细胞),并在体外(in vitro)和体内(in vivo)都具有完备的三胚层分化潜能。
中盛溯源的人类细胞研发中心按照?#20013;?#33647;品生产管理规范(cGMP)标准建成,包括1000 m2临床级细胞实验室(B+A级),1000 m2科研级细胞实验室(C+A级),220 m2屏障型实验动物房(C级)和350 m2分子实验室等研发生产平台。研发中心配置一系列先进的细胞研发、生产、质检设备,建立起了一整套标准化质量管理体系。中盛溯源目前已成功制备多株科研级和临床级hiPSC细胞株(健康型和疾病型),并应用于体外疾病建模、药物筛选和测试、动物移植实验等科研领域。
我们以?#32454;?#30340;质量标准完成制备、鉴定、储存、包装、物流等服务环节,满足客户的科研要求,保证后续实验的重复性和可靠性。

项目内容


描述
体细胞来源 推荐外周血作为重编程成体细胞来源,也?#37038;?#20854;他组织细胞(如皮肤成纤维细胞)
制备过程 采用非整合重编程方法制备hiPSC细胞株
hiPSC
无外源基因插入
培养条件
重编程及hiPSC培养均在化学成分明确的培养体系中进行,细胞质量稳定,分化潜能完
交付标准 单个供体制备3个hiPSC克隆,每个克隆提供冻存细胞2管(>2×106细胞/管)
交付周期
3-6个月




重编程流程


交付标准


项目 描述
供体样本传染病原检测 AIDS、Syphylis、Hepatitis B、Hepatitis C感染检测
细胞学检测 细胞形态、细胞生长情况、细胞数量、细胞活率
细胞表面标志物
SSEA4 / TRA-1-81,流式检测
内源性多能性基因表达
OCT4 / NANOG,qRT-PCR检测
无外源基因整合
载体序列PCR检测
基因组稳定性
染色体核型分析
微生物及内毒素检测
细菌、真菌、支原体及内毒素检测
细胞身份验证
确认来自供体同源组织
细胞分化潜能鉴定
畸胎瘤测试,可检测到三个胚层分化的组织




1、重编程hiPSC克隆形成图示

外周血重编程-hiPSC克隆形成阶段细胞形态图示。

中盛溯源在重编程建系上有着丰厚的经验和技术实力,每次重编程可获得上百个细胞克隆;

如?#36132;?#25152;示一个视野下拥有10个hiPSC克隆出现,大量的克隆出现保证了重编程的高成功率。标尺:200μm。


2、重编程后hiPSC克隆形态图示

外周血重编程初始阶段及扩增后的hiPSC克隆形态图示。

图A、B为重编程初始hiPSC克隆和扩增后的hiPSC克隆标尺:200μm

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